Abbexa 无细胞 DNA 试剂盒说明书

艾美捷Abbexa无细胞 DNA 试剂盒是通过酶水解裂解样品和通过二氧化硅磁珠的特异性吸附纯化无细胞 DNA 的理想解决方案。适用于从 0.5-10 ml 血清或血浆中分离纯化高质量的游离 DNA。提取的 DNA 可用于 PCR、qPCR 和 NGS，也可用于基于磁珠的核酸提取系统。

艾美捷 Abbexa套件组件：

结合缓冲液：120 毫升

清洁缓冲液：30 毫升

洗涤缓冲液：24 毫升

洗脱缓冲液：4 ml

蛋白酶 K (20 mg/ml)：3 × 1 ml

20% SDS：6 毫升

磁性无细胞珠：2 毫升

艾美捷Abbexa 无细胞 DNA试剂盒基本参数：

目标 游离 DNA

贮存 将磁珠在 2-8°C 下储存长达一年，不要冷冻。在室温下储存所有其他试剂。

使用说明 试剂制备：

工作结合缓冲液：在 120 毫升结合缓冲液中加入 40 毫升异丙醇，制备工作结合缓冲溶液。

清洁工作缓冲液：在 30 毫升清洁缓冲液中加入 30 毫升异丙醇，制备清洁工作缓冲溶液。

工作洗涤缓冲液：将 96 毫升异丙醇添加到 24 毫升洗涤缓冲液中以制备工作洗涤缓冲溶液。

注：

使用前涡旋磁珠。

使用无菌、无核酸和无核酸酶的离心管和移液器吸头。

游离 DNA 的成分含量J低，建议使用低核酸吸附离心管进行血浆储存、DNA 提取和 DNA 储存。

避免试剂、样品和分离的 DNA 反复冻融循环。

根据下表在 15 ml 或 50 ml 离心管中制备反应系统。

零件 血浆体积

0.5 毫升 1 毫升 2 毫升 4毫升 10 毫升

20% 安全数据表 25微升 50微升 100 微升 200 微升 500 微升

蛋白酶K 15微升 30微升 60微升 120 微升 300 微升

工作绑定缓冲区 0.75 毫升 1.5 毫升 3 毫升 6毫升 15 毫升

磁性无细胞珠 10微升 20微升 40微升 80微升 200 微升

检测程序：

1、根据上表建立反应体系。

2、涡旋管子 15 秒，然后在室温下放置 20 分钟。在这段时间内将试管倒置 3-5 次。

3、磁分离：将离心管放在磁力架上，然后用手轻轻地左右旋转离心管。当磁珠开始向管壁聚集时，反转自旋方向，重复 2-3 次。确保盖子上的任何珠子聚集到管壁上。静置 2 分钟并确保所有珠子都聚集在管壁上。

4、从磁珠的另一侧丢弃上清液，注意不要去除磁珠本身。从磁力架上取下试管并加入 1 ml 工作清洁缓冲液（含异丙醇）。涡旋 15 秒，然后转移到新的 1.5 ml 离心管中。如果磁珠留在原管中，将上清液转移回原管，洗涤，然后转移到 1.5 ml 离心管中。重复步骤 3 进行另一次磁选。

5、弃去上清液。将试管从磁力架上取下，加入 1 ml 工作洗涤缓冲液（含异丙醇）。涡旋 15 秒，然后重复步骤 3 进行另一次磁分离。

6、重复步骤 5。

7、丢弃上清液，包括盖子上的任何液体。建议使用较小尺寸的移液器吸头彻底去除上清液。

8、静置并风干 5-10 分钟。

9、根据下表添加洗脱缓冲液

零件 原始等离子体积

0.5 毫升 1 毫升 2 毫升 4毫升 10 毫升

洗脱缓冲液 20微升 30微升 50微升 75微升 200 微升

涡旋管 5 分钟。

10、将离心管放在磁性支架上。将液体转移到一个新的 1.5 ml 低核酸吸附离心管中，注意不要去除磁珠本身。

11、将分离的 DNA 储存在-20°C。