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Worthington果胶酶的特性及测定方案
2022-07-27 01:05:00 【Sylvia_sc】
艾美捷Worthington 胃蛋白酶是一种酸性蛋白酶。它的无活性酶原前体胃蛋白酶原在胃粘膜中产生。有几种胃蛋白酶被命名为 A、B、C 和 D。胃蛋白酶 A 是主要成分,其分子量为 35,000 道尔顿,如果底物是天然蛋白质,则底物如酪蛋白或血红蛋白的最适 pH 约为 1.0。胃蛋白酶优先在芳香族氨基酸(如苯丙氨酸和酪氨酸)的羧基处切割蛋白质。它不会在含有缬氨酸、丙氨酸或甘氨酸的键处断裂。基于 Anson J. Gen. Physiol., 22 , 79 (1938) 的方法使用血红蛋白作为底物测定胃蛋白酶。胃蛋白酶在 pH 值高于 6 时不稳定。
稳定性/储存: 胃蛋白酶在 2-8°C 下保存 1-2 年。
单位定义:一个单位在 37°C 下每分钟从变性血红蛋白中释放 0.001 A280 作为 TCA 可溶性水解产物。一个 FIP 单位,以 25°C 下每分钟释放的酪氨酸当量微摩尔数表示,可按如下方式计算:1 沃辛顿单位 x 0.0071 = FIP 单位。
Worthington胃蛋白酶的应用:
抗体的消化
用于药妆目的的胶原蛋白的制备
食品化学中蛋白质消化率的评估
活的乳腺上皮细胞的继代培养 (Riser 1983)
艾美捷Worthington胃蛋白酶相关研究:
胶原酶 (CLS1-4/CLSPA)
脱氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
血红蛋白 (HB)
透明质酸酶 (HSE/HSEP)
中性蛋白酶 (Dispase, NPRO)
蛋白酶 K (PROK)
相关文献:
1.Absolon, K.: 使用白蛋白 I 131 (RIHSA) 测定蛋白水解和抗蛋白水解活性 , Surg 论坛 5 , 543, 1954
2.Al -Janabi, J.、Hartsuck, J. 和 Tang, J.: 胃蛋白酶原活化的动力学和机制 , J Biol Chem 247 , 4628, 1972
3.Anderson, W. 和 Harthill, J.: 胃蛋白酶原激活肽中的胃蛋白酶抑制活性 , Nature 243 , 417, 1973
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