Worthington产气荚膜梭菌神经氨酸酶的特征及测定

艾美捷Worthington中性蛋白酶（分散酶）背景：

中性蛋白酶 (Dispase) 是一种非哺乳动物来源的无 (AOF) 金属中性蛋白酶，通过 Worthington 开发的方法纯化。其温和的蛋白水解作用使该酶特别适用于制备原代细胞和二次（传代）细胞培养，因为它对细胞膜温和。该蛋白酶还用作细胞分离和组织解离应用中的辅助酶，通常与胶原酶一起使用。

 

 

Worthington 多粘芽孢杆菌中性蛋白酶 (Dispase) 的特性：

分子量：  36 kda。

最佳 pH： 在很宽的 pH 范围内稳定：4.0-9.0，最佳 pH 5.9-7.0。

稳定性/储存： 在 2-8°C 下稳定 12 个月。用水或常用的平衡盐溶液或培养基复溶后，分装并储存在 -20°C。

单位定义：在 37°C、pH 7.5 条件下，以酪蛋白为底物，一个单位释放 1 微摩尔 Folin 阳性氨基酸（以酪氨酸计）。

特异性：含有亮氨酸和苯丙氨酸的肽键的非特异性切割。

活化剂：二价阳离子，包括Ca 2+、Mg 2+、Mn 2+和Fe 2+

抑制剂：EDTA (1mM)、EGTA、1-10-菲咯啉和重金属

应用：通常用于分离皮肤表皮和真皮，留下完整的上皮层和干细胞、肝细胞和其他细胞分离应用。然而，由于所涉及变量的多样性，应根据每个细胞/组织应用的经验确定确切的分离条件。

Worthington中性蛋白酶（分散酶）相关研究：

胶原酶 (CLS1-4/CLSS1-4/CLSPA)

脱氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

弹性蛋白酶 (ES/ESL/ESFF)

透明质酸酶 (HSE/HSEP)

木瓜蛋白酶 (PAP/PAPL/PAP2)

蛋白酶K (PROK)

胰蛋白酶 (TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK)

胰蛋白酶抑制剂 (LBI/OI/SI/SIC)

细胞分离优化系统 (CIT)

肝细胞分离系统 (HIS)

新生儿心肌细胞分离系统 (NCIS)

木瓜蛋白酶解离系统 (PDS/PDS2)

相关文献：

1.角质形成细胞培养， 基本细胞培养方案，（Pollard, J. 和 Walker, J., Eds.），Humana Press，117，1997

2.Akimoto, Y.、Obinata, A.、Endo, H. 和 Hirano, H.： 通过使用培养的鸡胚皮肤的表皮-真皮重组实验进行基底膜重建的免疫组织化学研究：肌腱蛋白的诱导 ， J Histochem Cytochem 40 , 1129 , 1992

3.Alvarez, V.、von der Weid, I.、Seldin, L. 和 Santos, A.： 生长条件对Paenibacillus peoriae NRRL BD-62 和Paenibac illus polymyxa SCE2 细胞外蛋白水解酶产生的影响。 , Lett Appl 微生物 43 , 625-30, 2006