Lumiprobe 自由基分析丨H2DCFDA说明书

艾美捷 Lumiprobe H2DCFDA（2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯）是一种常用试剂，用于研究活细胞中活性氧的产生。

H2DCFDA 是一种非荧光荧光素衍生物（其还原乙酰化形式）。该试剂仅在乙酰基裂解和试剂在细胞中氧化并转化为 2',7'-二氯荧光素后才开始发射荧光。这是一种亮绿色荧光染料（最大吸收 511 nm，最大荧光 533 nm）。该试剂可用于活细胞中的测定，与样品固定不兼容。

H2DCFDA 中的乙酰基增加其亲脂性并改善其细胞膜通透性。一旦进入细胞，染料就会被细胞酯酶脱乙酰化，从而带电并更好地固定在细胞内。活性氧形式的氧化导致荧光产物（2',7'-二氯荧光素）的形成，并且可以使用各种方法检测，例如使用流式细胞仪、读板器或荧光显微镜。

使用艾美捷 Lumiprobe H2DCFDA的建议：

使用新配制的试剂溶液（工作溶液不适合长期储存，因为试剂会逐渐氧化）。

针对特定细胞系和测定条件，选择试剂脱乙酰和氧化所需的最佳试剂工作浓度和孵育时间。如果没有针对特定细胞系推荐的方案，则从 1 到 10 μM 的浓度开始并孵育 30 分钟。

不要在存在血清的情况下将染料与细胞一起孵育，因为它含有切割 H2DCFDA 的酶。

艾美捷 Lumiprobe H2DCFDA化学性质：

形态： 无色固体

分子量： 487.29

CAS号： 4091-99-0

分子式： C 24 H 16 Cl 2 O 7

IUPAC 名称：2-(3,6-二乙酰氧基-2,7-二氯-9H-xanthen-9-yl)苯甲酸

溶解度： 良好的 DMSO、乙醇和 DMF

质量控制：NMR 1 H, HPLC-MS (95%)

储藏条件：-20°C 避光条件下交货后 12 个月。运输：在室温下长达 3 周。防潮。避免储存不受光照和不必要的原液冻融循环。如果试剂多次使用，强烈建议将其储存在干燥的氩气或氮气气氛中。

光谱特性

最大激发/吸收，nm： 511

ε, L⋅mol -1 ⋅cm -1： 118626

最大发射，纳米： 533

荧光量子产率： 0.76

CF 260： 0.17

CF 280： 0.14

艾美捷 Lumiprobe H2DCFDA相关研究：

BDP 493/503 脂质染色剂

BDP 493/503 是一种亲脂性绿色荧光染料，用于细胞膜、脂质和油脂的染色和追踪。

BDP 630/650 马来酰亚胺

BDP 630/650 马来酰亚胺是一种硫醇反应性、基于硼二吡咯亚甲基的染料，经过调整以匹配 Cyanine5 荧光团的远红通道。

花青3酰肼

Cyanine3 hydrazide 是 Cy3 通道的羰基反应性染料。