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Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒说明书
2022-07-05 20:35:00 【Sylvia_sc】
蛋白质定量试剂盒(BCA法)是常用的蛋白浓度检测方法之一。该方法原理是蛋白质在碱性条件中将铜离子(Cu2+)还原为亚铜离子(Cu+),生成的Cu+与BCA形成紫色络合物,并在562 nm处具有很强的吸收峰,吸光值与样品中蛋白质的含量成正比,根据吸光值可以推算出蛋白浓度。
Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒组分:
• BCA试剂A
• BCA试剂B
• BSA标准品
Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒实验建议:
BCA法适用于检测20-2,000 µg/mL范围内的蛋白浓度,最小检测蛋白量达到0.4 µg,待测样品体积为 1-20 µL。
Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒特点:
• 节省时间—比传统的Lowry方法更容易,速度快4倍。
• 灵敏度高—检测限低至20 ug/mL,最低检测蛋白量达到0.4 ug。
• 线性卓越—线性工作范围20-2000 ug/mL。
• 良好的稳定性—与染料结合的方法相比,检测不同蛋白质分子的变异系数更小。
• 兼容性好—不受大多数离子型和非离子型洗涤剂的影响,样品中最多可兼容5% SDS, 5% Triton X-100, 5% Tween-20,60,80。
使用中注意事项:
• 1. 用酶标仪测定 562 nm 的吸光度,或在540-595 nm之间的其他波长的吸光度。
• 2. BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween20、60、80。但BCA法受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10 mM,无 EGTA,二硫苏糖醇(DTT)低于1 mM,β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。
• 3. 建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应会因温度升高而加快。
• 4. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,使用蛋白质定量试剂盒(Bradford法)
Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒标准曲线:
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