Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒说明书

蛋白质定量试剂盒（BCA法）是常用的蛋白浓度检测方法之一。该方法原理是蛋白质在碱性条件中将铜离子（Cu2+）还原为亚铜离子（Cu+），生成的Cu+与BCA形成紫色络合物，并在562 nm处具有很强的吸收峰，吸光值与样品中蛋白质的含量成正比，根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒组分：

• BCA试剂A

• BCA试剂B

• BSA标准品

Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒实验建议：

BCA法适用于检测20-2,000 µg/mL范围内的蛋白浓度，最小检测蛋白量达到0.4 µg，待测样品体积为 1-20 µL。

Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒特点：

• 节省时间—比传统的Lowry方法更容易，速度快4倍。

• 灵敏度高—检测限低至20 ug/mL，最低检测蛋白量达到0.4 ug。

• 线性卓越—线性工作范围20-2000 ug/mL。

• 良好的稳定性—与染料结合的方法相比，检测不同蛋白质分子的变异系数更小。

• 兼容性好—不受大多数离子型和非离子型洗涤剂的影响，样品中最多可兼容5% SDS, 5% Triton X-100, 5% Tween-20，60，80。

使用中注意事项：

• 1. 用酶标仪测定 562 nm 的吸光度，或在540-595 nm之间的其他波长的吸光度。

• 2. BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20、60、80。但BCA法受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10 mM，无 EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于1 mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。

• 3. 建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应会因温度升高而加快。

• 4. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，使用蛋白质定量试剂盒（Bradford法）

Abbkine BCA法 蛋白质定量试剂盒标准曲线：